超分辨率荧光显微成像技术对拟南芥核中 RNA polymerase II 富集状态分析
“ RNA polymeraseII(RNAPII)负责大多数真核生物蛋白编码基因的转录。分析RNAPII的拓扑分布和定量有助于理解其在细胞间期的功能。以前的研究表明,RNAPII分子在分化的拟南芥核的异染色质中形成网状结构,而不是像在哺乳动物核中观察到的那样组织在不同的 "转录工厂 "中。 ”
“ RNA polymeraseII(RNAPII)负责大多数真核生物蛋白编码基因的转录。分析RNAPII的拓扑分布和定量有助于理解其在细胞间期的功能。以前的研究表明,RNAPII分子在分化的拟南芥核的异染色质中形成网状结构,而不是像在哺乳动物核中观察到的那样组织在不同的 "转录工厂 "中。 ”
近些年,超分辨率显微镜技术克服了这一障碍,使用不同的方法来区分位于同一衍射极限体积内的荧光分子。其中之一称为随机光学重建显微镜 (STORM),它基于单分子定位,通过在不同时间点随机打开衍射受限体积内的光开关荧光分子,因此它们的信号基本上不会重叠。当在空间中隔离时,可以通过定位其信号的中心位置来确定每个单独荧光团的位置。然后从随时间累积的众多分子定位生成超分辨率图像,提供 < 50 nm 的空间分辨率。
在本研究中,研究者主要借助STORM超分辨率显微镜来研究淋巴结中T细胞受体的空间分布,目前在国内, 随机光学重建显微镜STORM已成功实现商用 ,有需要STORM成像技术进行实验研究的专家老师们, 请文末填写问卷, 即可预约获得 iSTORM 超高分辨率显微成像系统试拍服务~
在这里,作者借助STORM成像,表明TGN/内涵体定位的货物衔接子AP-1,GGA2和epsinR,在近核高尔基体区域形成长度超过250纳米的伸长结构。作者的数据表明,TGN/内涵体定位的货物衔接子具有明显的空间关系。空间分离的货物衔接子GGA2和AP-1分别调节Frizzled6和Vangl2的分选,并且空间相关的货物衔接子可以协同调节特定的分选过程。
本文介绍威斯尼斯人wns888入口现已发布的超高分辨率显微成像系统 iSTORM的主动锁定功能就可以减少外界噪声给成像造成的影响。
在此,作者提出了一种新的方法来观察这些病原体在感染过程中的情况,从而避免了这些问题:通过对胞内病原体鼠伤寒沙门氏菌进行生物正交标记,并通过使用这些生物正交组来引入与随机光学重建显微镜STORM兼容的荧光团,并将其置于相关的光电子显微镜(CLEM)工作流程中,病原体可以在其宿主细胞环境鼠伤寒菌中成像,分辨率为20 nm。因此,STORM-CLEM方法提供了一种了解这些病原体感染过程的新方法。
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